酵母活性測(cè)定儀是一個(gè)用于酵母生長(zhǎng)和代謝監(jiān)測(cè)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備。下面將詳細(xì)介紹如何正確地使用酵母活性測(cè)定儀,并獲取準(zhǔn)確的測(cè)試結(jié)果。
下面咱們來(lái)了解下酵母活性測(cè)定儀的使用步驟:
1、將新鮮的酵母菌落接入無(wú)菌LB培養(yǎng)基中,室溫下靜置24小時(shí)。
2、從酵母培養(yǎng)基中選擇宏觀形態(tài)良好的酵母菌落,移植到無(wú)菌LB平板上,并在37℃條件下孵育過(guò)夜。
3、取少量培養(yǎng)基進(jìn)行泡沫挑選,挑選完整而呈白色并透明度適中的點(diǎn)。將液體微生物菌落通過(guò)5mL轉(zhuǎn)化管向無(wú)菌50mL培養(yǎng)瓶注入堿液至管口高度,搖勻后高壓滅菌20min。
4、活性測(cè)定時(shí),將培養(yǎng)瓶保持無(wú)菌狀態(tài),快速取出操作所需大腸桿菌數(shù)量,然后立即加入新制備的熒光素溶液,震蕩均勻。
5、將取少量液體,經(jīng)皮下接種小鼠(代謝實(shí)驗(yàn))或灌胃(藥效實(shí)驗(yàn)),觀察其生物學(xué)效應(yīng)。
6、收集熒光素結(jié)合強(qiáng)度數(shù)據(jù),檢查能否檢測(cè)到離體酵母菌的存在,并分析菌種在容器中的分布。
7、將操作流程分別重復(fù)三次,獲取系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)值。
8、記錄每次實(shí)驗(yàn)結(jié)果,計(jì)算同一菌種活性測(cè)定結(jié)果的平均值,減去空白試管中的基線信號(hào),并設(shè)置閾值。
9、操作前需要確保儀器處于干燥清潔狀態(tài),如有水珠需要及時(shí)拭去,此外還需要核對(duì)設(shè)備是否在標(biāo)定狀態(tài)下。
注意事項(xiàng):
1、在使用之前,必須讓酵母懸浮液靜置2-3小時(shí),以提高測(cè)量的準(zhǔn)確性。
2、確保試管沒(méi)有污垢,否則會(huì)影響測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性。
3、在操作之前先檢查儀器是否正常工作,避免在測(cè)定過(guò)程中產(chǎn)生誤差。
4、遵循正確的使用方法,并及時(shí)清潔設(shè)備以保證它的使用壽命和精度。
通過(guò)這些步驟使用酵母活性測(cè)定儀,可以很容易地獲取準(zhǔn)確的測(cè)試結(jié)果,幫助實(shí)驗(yàn)者進(jìn)行有效的研究工作。